小鼠elisa kit試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中小鼠腫瘤壞死因子γ(TNF-γ)的含量。
實驗原理:
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被小鼠腫瘤壞死因子γ(TNF-γ)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并進(jìn)行洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠腫瘤壞死因子γ(TNF-γ)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
優(yōu)勢:
靈敏度:有二層含義,1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的低量的能力;2)為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。
特異性:常用交叉反應(yīng)率表示。含有與待測物相近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在交叉反應(yīng),使測定結(jié)果升高,可能導(dǎo)致假陽性,所以交叉反應(yīng)是評價其質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)。
精度:ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV%,其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時考察線性范圍。
準(zhǔn)確度:通過添加回收實驗進(jìn)行評價。
簡便性:指在不影響試劑的前三項指標(biāo)的前題下,實驗和測定步驟越少越好,在定性實驗中結(jié)果判斷簡單明了,定量試驗結(jié)果計算也應(yīng)簡單。
安全性:指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。
經(jīng)濟(jì)性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進(jìn)步降低成本,而市場價格比較合理。