Sigma:藥典重組胰蛋白酶,T0303-1G,CAS: 9002-07-7

屬性：

質(zhì)量水平：200

類型：Type IX-S

形式：lyophilized powder

specific activity：13,000-20,000 BAEE units/mg protein

分子量：23.8 kDa

特色行業(yè)：Diagnostic Assay Manufacturing

異質(zhì)活性：chymotrypsin ≤1.0 units/mg protein

儲存溫度：?20°C

應(yīng)用：

對于胰蛋白酶消化肽，胰蛋白酶:肽的使用比例約為1:100至1:20。本品的典型用途是使貼壁細胞從培養(yǎng)表面脫落。 使細胞解離所需的胰蛋白酶濃度主要取決于細胞類型和培養(yǎng)物代數(shù)。 Trypsins也被用于細胞培養(yǎng)過程中的細胞再懸浮，在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中用于蛋白質(zhì)的消化，以及在各種凝膠消化中。 其他的應(yīng)用包括通過基于膜的技術(shù)評估結(jié)晶，以及在一項研究中確定蛋白質(zhì)折疊速率和產(chǎn)量可以被動力學(xué)陷阱的存在所限制。

包裝：

1, 10 g in poly bottle

生化/生理作用：

胰蛋白酶可切割賴氨酸和精氨酸殘基的C末端肽段。 如果酸性殘基位于切割位點的任意一側(cè)，則該反應(yīng)的水解速度減慢，并且如果脯氨酸殘基位于切割位點的羧基側(cè)，則水解停止。 胰蛋白酶活性的最佳pH條件為7-9。 胰蛋白酶還可以切割氨基酸合成衍生物的酯和酰胺鍵。 將EDTA添加到胰蛋白酶溶液中作為螯合劑，用于中和鈣離子和鎂離子以防止其抑制胰蛋白酶活性。 去除這些離子會增加酶活性。

絲氨酸蛋白酶抑制劑（包括DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF和抑肽酶等）會抑制胰蛋白酶。

組分：

胰蛋白酶由含有223個氨基酸殘基的單鏈多肽組成，由胰蛋白酶原在Lys - lle肽鍵處切去N-端六肽而得。 這些氨基酸序列通過6個二硫鍵交聯(lián)。 這就是胰蛋白酶（即β-胰蛋白酶）的天然形式。 BETA-胰蛋白酶可自溶，在Lys-Ser殘基裂解，產(chǎn)生α-胰蛋白酶。 胰蛋白酶是絲氨酸蛋白酶家族的成員。

注意：

1 mM HCl的胰蛋白酶溶液分裝后-20℃凍存可在1年內(nèi)保持穩(wěn)定。 Ca2+ 的存在也會減少胰蛋白酶的自溶而在溶液中保持穩(wěn)定。 胰蛋白酶在2.0 M尿素、2.0 M鹽酸胍或0.1% (w/v) SDS中也能保持大部分活性。

單位定義：

一個BAEE單位以BAEE作為底物，在25°C、pH 7.6條件下每分鐘每毫升產(chǎn)生0.001的ΔA253 。一個BTEE單位=320個ATEE單位。反應(yīng)體積=3.2mL（1cm的光徑）。

制備說明：

該產(chǎn)品是一種凍干粉，可以25 mg/mL溶于Hank′s平衡鹽溶液。

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